DNB pooling

温馨提示：

使用普通尖口的吸头缓慢进行DNB取样。所有DNB样本取样完成后，用无滤芯阔口吸头进行混匀。
如混合样本中存在CITE V1.1-cDNA与CITE V1.1-ADT文库pooling情况，为了保证测序碱基平衡，建议将CITE V1.1-cDNA与CITE V1.1-ADT文库质量比不低于1:1进行DNB pooling，即CITE V1.1-cDNA文库投入质量高于CITE V1.1-ADT文库。

当被pooling样本为同样应用或具有类似的插入片段时，根据样本所需的数据量和DNB浓度计算各样本的DNB pooling体积。

根据以下公式，计算每个样本理论相对量V_n：
$V_{n} = \frac{样本需求数据量}{样本 D N B 浓度}$
n表示样本ID。
根据以下公式，计算总相对量V₂：
$V_{2} = V_{A} + V_{B} + . . . + V_{H}$
根据以下公式，计算每个样本的pooling体积。
每张载片所需样本所需数据量DNB总体积为348 μL，每个样本的pooling体积为：
$V_{D N B} = 348 \times V_{n} / V_{2}$
注意：
如pooling后DNB总体积低于348 μL，需再次制备DNB直至总体积为348 μL。切勿使用TE缓冲液或其他试剂补足体积。